分子细胞生物学(Cell Biology)是在显微、亚显微和分子水平三个层次上，研究细胞的结构、功能和各种生命规律的一门科学。细胞生物学技术是现代生命科学研究中重要的工具，近年来，随着生物物理学，生物化学等相关学科的发展，细胞生物学研究技术也不断更新迭代，以高通量测序技术、数字PCR等技术为代表。为让广大从事医学、生命科学事业的人员更多的了解细胞生物学技术的基础理论、研究进展及实验技术方法等。本培训班将从实验思路、实验原理、实验技能等方面逐一为大家剖析。微旋基因定期举办全国“分子细胞生物学研究方法与实验技能精品培训班”，限额20人。每位学员均在教师的指导下，独立完成一系列全部实验,实验两人一组,人人操作。
课程安排
| 授课内容 |
| 培训报到 |
| 理论讲解： 现代分子细胞生物学常用技术原理及其应用概述 1.分子生物学新技术（核酸提取分离、PCR、测序分析，常用软件snapgene/Primer6等） 2.细胞生物学常用技术（培养、储存、分离、鉴定、分析等） 实验操作-细胞培养技术 细胞传代、细胞计数、细胞接种、爬片 |
| 理论讲解： 1. 细胞转染技术（生物转染-病毒、物理转染-显微注射、电转、基因枪、化学转染-阳离子脂质体、阳离子聚合物） 2. 基于细胞培养的基因功能研究方法（基因沉默-siRNA、miRNA、shRNA、基因敲除-ZFN、TALEN、CRISPR、基因过表达-持续性表达、可诱导表达、组织特异性表达） 实验操作： 1.细胞转染 2.细胞给药处理 3.细胞活力检测（MTT、CCK-8、cell-titer blue） 4.细胞迁移和细胞侵袭实验 5.细胞流式检测（细胞周期、细胞凋亡、细胞转染效率流式检测） |
| 理论讲解：高通量测序技术及其应用 1.一代测序技术、二代测序技术、三代测序技术 2.基因芯片技术 实验操作： 1.细胞总RNA提取及鉴定 2.反转录cDNA合成、实时荧光定量PCR：标准曲线制作、引物设计合成、结果分析 3.细胞/组织总蛋白提取，亚细胞器总蛋白提取（胞浆蛋白提取、核蛋白提取） 4.蛋白浓度测定：BCA法测定蛋白浓度 5.SDS-PAGE：蛋白胶的配置、蛋白电泳分离 6.Western blot：转膜、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显影、灰度值测定、数据处理 |
| 理论讲解： 1.免疫荧光技术及其应用 2.实时荧光定量PCR技术原理及其应用 3.数字PCR技术原理及其应用 4.流式技术原理及其应用 实验操作-免疫荧光技术 1.细胞爬片 2.细胞固定 3.细胞通透 4.抗体染色 |
参加对象
从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。
授课方式
理论讲授和实际操作紧密结合。每位学员在辅导教师的指导下，独立完成实验操作。
